Menu
Laboratoře

Vyšetření buněčného chimerismu po HSCT

SOP 01: Vyšetření buněčného chimerismu po alogenní HSCT analýzou délkových polymorfismů a sex specifických lokusů

Principem molekulárně genetické analýzy buněčného chimerismu po transplantaci je sledování podílu autologní krvetvorby pacienta před HSCT k podílu dárcovské krvetvorby na molekulární úrovni (DNA izolovaná z buněk periferní krve (PK) nebo kostní dřeně (KD)). Molekulární analýza individuálního hemopoetického chimerismu v daném časovém bodě po transplantaci krvetvorných buněk je pak nespecifickým markerem potransplantační krvetvorby pro všechny diagnózy s cílem poskytnout co nejpřesvědčivější diagnostické podklady pro klinická rozhodnutí. Stanovením genotypů informativních polymorfismů DNA je možné sledovat přihojení štěpu, přežívání a množení dárcovských buněk, svědčící o její úspěšnosti hlavně v bezprostředním období po transplantaci. Zároveň je toto vyšetření důležité pro včasné zachycení návratu pacientovy krvetvorby, kdy naznačuje riziko návratu nemoci a možnost odhojení štěpu. V tomto včasném období je možno manipulací s imunosupresí a eventuelně dalšími manipulacemi se štěpem celý proces ovlivnit.

Používané metody kvantifikace a dlouhodobého sledování buněčného chimerismu jsou založeny na stanovení genotypu délkových polymorfismů typu VNTR (Variable Number of Tandem Repeats) a STR (Short Tandem Repeats). Jejich výhodou je vysoký stupeň informativnosti a neomezené kvantitativní stanovení. Citlivost se pohybuje mezi 1 - 5 % u VNTR polymorfismů a 1% u STR polymorfismů. Metoda založená na stanovení genotypů informativních SNP (Single Nucleotid Polymorpism) a krátkých inzercí a delecí metodou kvantitativní PCR v reálném čase se vyznačuje citlivostí 0,01 %, čímž umožní zachytit relaps 100x dříve než klasické metody. Metoda qrt PCR umožní detekovat tzv. mikrochimerismus, tedy stav, kdy podíl autologního genotypu je menší než 1 %. Metodu lze využít i v případech vyšetření přítomnosti maternálního engraftmentu.

SOP 07: Vyšetření buněčného chimerismu po alogenní HSCT analýzou jednonukleotidových polymorfismů a krátkých inzercí a delecí metodou kvantitativní PCR v reálném čase

Principem molekulárně genetické analýzy buněčného chimerismu po transplantaci je sledování podílu autologní krvetvorby pacienta před HSCT k podílu dárcovské krvetvorby na molekulární úrovni (DNA izolovaná z buněk periferní krve (PK) nebo kostní dřeně (KD)). Molekulární analýza individuálního hemopoetického chimerismu v daném časovém bodě po transplantaci krvetvorných buněk je pak nespecifickým markerem potransplantační krvetvorby pro všechny diagnózy s cílem poskytnout co nejpřesvědčivější diagnostické podklady pro klinická rozhodnutí. 

Stanovením genotypů informativních polymorfismů DNA je možné sledovat přihojení štěpu, přežívání a množení dárcovských buněk, svědčící o její úspěšnosti hlavně v bezprostředním období po transplantaci. Zároveň je toto vyšetření důležité pro včasné zachycení návratu pacientovy krvetvorby, kdy naznačuje riziko návratu nemoci a možnost odhojení štěpu. V tomto včasném období je možno manipulací s imunosupresí a eventuelně dalšími manipulacemi se štěpem celý proces ovlivnit.

Používané metody kvantifikace a dlouhodobého sledování buněčného chimerismu jsou založeny na stanovení genotypu délkových polymorfismů typu VNTR (Variable Number of Tandem Repeats) a STR (Short Tandem Repeats). Jejich výhodou je vysoký stupeň informativnosti a neomezené kvantitativní stanovení. Citlivost se pohybuje mezi 1 - 5 % u VNTR polymorfismů a 1% u STR polymorfismů. Metoda založená na stanovení genotypů informativních SNP (Single Nucleotid Polymorpism) a krátkých inzercí a delecí metodou kvantitativní PCR v reálném čase se vyznačuje citlivostí 0,01 %, čímž umožní zachytit relaps 100x dříve než klasické metody. Metoda qrt PCR umožní detekovat tzv. mikrochimerismus, tedy stav, kdy podíl autologního genotypu je menší než 1 %. Metodu lze využít i v případech vyšetření přítomnosti maternálního engraftmentu.

Technická vedoucí: Mgr. Hana Čechová


Rychlý kontakt

Vedoucí Komplementu laboratoří
Tel:+420 221 977 208
Fax:+420 221 977 208

Zástupkyně vedoucího Komplementu laboratoří
Tel:+420 221 977 263

Telefonní seznam ÚHKT


Provozní doba

Ambulance
Po – Pá: 7:00–18:00

Denní nemocnice
Víkendy: 9:00–13:00

Dárci
Po – Pá: 7:00–10:30

Návštěvy
Lůžkové oddělení
Po – Pá: 13:00–18:00

JIP a Transplantační jednotka
Po – Pá: 14:00–17:00

Kudy k nám

map

Ústav hematologie a krevní transfuze
U Nemocnice 2094/1
128 20 Praha 2

Nejbližší stanice metra: Karlovo náměstí (linka B)

Nejbližší stanice tramvaje: Karlovo náměstí (10, 16, 22), Moráň (3, 6, 10, 16, 18, 24)

Nejbližší stanice autobusu: U nemocnice (291), Karlovo náměstí (176)

Jak se k nám dostanete